Biosynteza kofaktora molibdenu u ludzi. Identyfikacja dwóch grup komplementacji pacjentów z niedoborem kofaktorów i wstępna charakterystyka dyfundującego prekursora molibdopteryny.

Niedobór kofaktora molibdenu jest wyniszczającą chorobą u pacjentów dotkniętych objawami połączonego niedoboru oksydazy siarczynowej i dehydrogenazy ksantynowej. Ze względu na wyjątkową labilność wyizolowanego, funkcjonalnego kofaktora molibdenu bezpośrednia kofaktorowa terapia zastępcza nie jest możliwa i podjęto poszukiwanie stabilnych biosyntetycznych związków pośrednich. Z badań hodowanych wspólnie fibroblastów od dotkniętych osób zidentyfikowano dwie grupy komplementarne. Kokultura z komórek grupy A i grupy B, bez tworzenia heterokaryonów, doprowadziła do pojawienia się aktywnej oksydazy siarczynowej. Zastosowanie kondycjonowanych pożywek wskazało, że względnie stabilny, dyfuzyjny prekursor wytwarzany przez komórki z grupy B może być użyty do naprawy oksydazy siarczynowej w komórkach biorcy z grupy A. Continue reading „Biosynteza kofaktora molibdenu u ludzi. Identyfikacja dwóch grup komplementacji pacjentów z niedoborem kofaktorów i wstępna charakterystyka dyfundującego prekursora molibdopteryny.”

Oddzielenie indukowanego konkanawaliną ludzkiego supresora i limfocytów T pomocniczych metodą autologicznej rozetki erytrocytów.

Bardzo niewiele normalnych ludzkich limfocytów T krwi obwodowej jest zdolnych do wiązania autologicznych erytrocytów w celu utworzenia rozetek, podczas gdy w populacji limfocytów T aktywowanych przez konkanawalinę A (Con A) poziomy autorozytu są znacząco zwiększone. Frakcjonowanie limfocytów T aktywowanych Con A z autologicznymi erytrocytami do komórek autorozerujących i nie-nastawczych wykazuje, że aktywność supresora, ale nie pomocnicza, występuje w populacji autorytatywnej, podczas gdy odwrotność jest prawidłowa dla nieokreślonej populacji. Obie te czynności są zależne od Con A. Ludzkie komórki supresorowe indukowane Con A można zidentyfikować i oddzielić od indukowanych Con A ludzkich komórek pomocniczych techniką autorosette. Badania powierzchniowych właściwości autoroztylkujących i nie-nastawczych komórek T wskazują, że istnieje niewielka korelacja pomiędzy aktywowanymi supresorami i podzbiorami komórek pomocniczych T zdefiniowanymi techniką autorosette i albo zdefiniowanymi przez przeciwciała monoklonalne (które są w stanie rozróżnić te podzestawy w spoczynku, ale nie aktywowane komórki T) lub te zdefiniowane przez receptory Fc. Continue reading „Oddzielenie indukowanego konkanawaliną ludzkiego supresora i limfocytów T pomocniczych metodą autologicznej rozetki erytrocytów.”

Pocieszyciel błony spektralnej: wariant sporyny związany z autosomalną dominującą dziedziczną sferocytozą i wadliwym wiązaniem z białkiem 4.1.

Przeanalizowaliśmy sekwencję DNA cDNA kodującego region końcowy NH2 beta-spetryny od członków spokrewnionych z autosomalną dominującą dziedziczną sferocytozą związaną z wadliwym wiązaniem białka 4.1. Znaleźliśmy mutację punktową w kodonie 202 w obrębie 272 aminokwasowego końca NH2 beta-spektrum. TGG zmieniono na CGG, co spowodowało zastąpienie tryptofanu argininą. Podstawowa zmiana eliminuje normalnie występujące miejsce restrykcyjne PvuII i tworzy nową stronę MspI. To odkrycie umożliwiło szybkie wykrycie lub wykluczenie mutacji na poziomie DNA wśród członków rodziny, w tym jednego członka, dla którego tę analizę przeprowadzono prenatalnie. Continue reading „Pocieszyciel błony spektralnej: wariant sporyny związany z autosomalną dominującą dziedziczną sferocytozą i wadliwym wiązaniem z białkiem 4.1.”

Ekspresja różnych przekaźnikowych RNA Na + w mięśniu sercowym szczura. Dowód na specyficzny dla serca kanał Na +.

W badaniu tym zbadano różnorodność ekspresji genu kanału Na + w nienaruszonej tkance sercowej i oczyszczonych komórkach miokardium. Badanie przesiewowe noworodkowych bibliotek cDNA mięśnia sercowego szczura z zachowaną sondą cDNA Na + kanału szczurzego mózgu Na +, doprowadziło do wyizolowania i scharakteryzowania przypuszczalnej sondy cDNA na kanale Na + szczura serca (pCSC-1). Wydedukowana sekwencja aminokwasowa pCSC-1 wykazała uderzający stopień homologii z węgorzem, szczurzej mózgu i szczurzym 2 kanałem Na + mózgu, tym samym identyfikując pCSC-1 jako spokrewniony członek rodziny genów kanału Na +. Analiza Northern blot ujawniła ekspresję 7-kb transkryptu CSC-1 w tkance sercowej szczura i oczyszczonych komórkach mięśnia sercowego, ale niewielką lub żadną wykrywalną ekspresję CSC-1 w mózgu szczura, mięśniu szkieletowym, odnerwionym mięśniu szkieletowym lub wątrobie. Stosując ochronę RNase i hybrydyzację Northern blot ze specyficznymi sondami genu kanału Na + szczurzego mózgu, ekspresję szczurzego kanału Na + mózgu myszy obserwowano w mięśniu sercowym szczura, ale nie wykryto wykrywalnej ekspresji genu 2 szczurzego mózgu. Continue reading „Ekspresja różnych przekaźnikowych RNA Na + w mięśniu sercowym szczura. Dowód na specyficzny dla serca kanał Na +.”