Proteiny DCC i rokowanie w raku jelita grubego

Rak jelita grubego stopnia II stopnia lub Dukesa stopnia B2 stanowi około jedną trzecią przypadków raka okrężnicy i odbytnicy diagnozowanych corocznie w Stanach Zjednoczonych. Chirurgia może wyleczyć 80 procent z tych przypadków, ale rokowanie jest słabe w pozostałej części, a w przeciwieństwie do raka jelita grubego stopnia III, choroba II stadium nie korzysta z terapii adjuwantowej.1-7 Ostatnie badanie Jen et al. stwierdzili, że alleliczna utrata chromosomu 18q była związana z rokowaniem u pacjentów z rakiem okrężniczo-odbytniczym w stopniu II.8 Zatrzymanie obu alleli przewidywało korzystny wynik, podczas gdy utrata jednego allelu przewidywała zły wynik, podobny do wyniku w stadium III nowotworów . Określenie statusu chromosomu 18q może zatem pomóc w stratyfikacji pacjentów z chorobą w stadium II na grupy wysokiego ryzyka i grupy niskiego ryzyka. Specyficzny gen dotknięty utratą alleli w rakach jelita grubego, badany przez Jen et al. nie został zidentyfikowany, ale gen DCC (usunięty w raku jelita grubego), który znajduje się w chromosomie 18q21.2 bezpośrednio przylegającym do ocenianych loci, jest silnym kandydatem. Hahn i in. Niedawno odkryto gen w obrębie tego regionu, który zmapowali na chromosomie 18q21.1 i nazwano DPC4 (usunięty w locus 4 trzustki) .9 Ten gen, który wydaje się inny od DCC, również musi być wzięty pod uwagę, gdy utrata heterozygotyczności występuje w chromosom 18q. W celu dalszej oceny genu DCC w raku jelita grubego, zbadaliśmy ekspresję białka DCC w stadium II i III raka jelita grubego immunohistochemicznie i oceniliśmy jego znaczenie jako niezależnego markera prognostycznego.
Metody
Pacjenci i próbki nowotworów
Sto trzydzieści dwie próbki utrwalone w formalinie, zatopione w parafinie od pacjentów ze sporadycznymi rakami jelita grubego stopnia II lub III uzyskano z archiwalnych banków nowotworowych w Joint Center for Radiation Therapy – New England Deaconess Hospital w Bostonie, a Lahey Hitchcock Medical Center w Burlington, Massachusetts. Lecznicze resekcje przeprowadzono odpowiednio w latach 1965-175 i 1988-1990. Zebrane w celach badawczych dane z tych źródeł reprezentowały grupy pacjentów, dla których dostępna była tkanka archiwalna i odpowiednie dane dotyczące patologicznych objawów i obserwacji klinicznej. Etapowanie opierało się na wynikach patologicznych i chirurgicznych. Kontynuacja tej retrospektywnej analizy została przeprowadzona poprzez przegląd zapisów pacjentów i skontaktowanie się z lekarzami pacjentów, z wynikami potwierdzonymi od 10 marca 1996 r.
Przeciwciała
Skrawki guza zatopione w parafinie początkowo oceniano immunohistochemicznie za pomocą panelu przeciwciał przeciwko DCC. Zastosowano jedno przeciwciało monoklonalne (klon G97-449, Pharmingen, San Diego, CA) i trzy przeciwciała poliklonalne, 721, 723 i 74,10, wszystkie rozpoznające epitopy w domenie cytoplazmatycznej DCC. Przeciwciało 721 wzbudzono przeciwko białku fuzyjnemu z domieszką heksahistydyny ludzkiego DCC w cytoplazmie i oczyszczono przez chromatografię powinowactwa na kolumnie z antygenem-agarozą. Przeciwciała 723 i 724 wzbudzono przeciwko białku fuzyjnemu z domieszką heksopusu DCC cytoplazmatycznego DCC i oczyszczono w podobny sposób. 10 Specyficzność każdego przeciwciała wykazano za pomocą analizy Western blot z tkanki z ośrodkowego układu nerwowego, gdzie DCC ulega ekspresji na wysokich poziomach. , a następnie testowane przez barwienie immunohistochemiczne tkanki okrężnicy
[więcej w: polyporus, bupropion, hemochromatoza wtórna ]
[patrz też: hemochromatoza wtórna, hiszpańska mucha skutki uboczne, początki muzyki ]